黑人精品欧美一区二区蜜桃,综合色 中文,偷拍自拍欧美亚州,综合国产亚洲欧美6666

產(chǎn)品分類

您的位置:首頁 > 技術(shù)文章 > 拿到人肝癌細胞HEPG2后要先這么處理

技術(shù)文章

拿到人肝癌細胞HEPG2后要先這么處理

更新更新時間:2020-12-26 瀏覽次數(shù):2064

  拿到人肝癌細胞HEPG2后要先這么處理。
  1、復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?50px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
  2、人肝癌細胞HEPG2細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
  對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
 ?。?)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
  (2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
 ?。?)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
 ?。?)收到人肝癌細胞后推薦將細胞懸液按1:2的比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,建議凍存一支備用,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2到1:5的比例進行。
  人肝癌細胞HEPG2細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。
  下面T25瓶為例;
  (1)細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入2ml*培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
 ?。?)1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。
 ?。?)將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
 

鏡像綺點(上海)細胞技術(shù)有限公司地址:上海市奉賢區(qū)茂園路260號臨港南橋科技城56號樓7層 郵箱:3844913394@qq.com

公司版權(quán)所有 © 2025   備案號:滬ICP備2024064724號-1  管理登陸  技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)  GoogleSitemap

在線客服 聯(lián)系方式 二維碼

服務(wù)熱線

400-021-2021

掃一掃,關(guān)注我們

人人澡人人看| 激情60久久久久久久久久| 欧美在线日韩精品一区不卡| 高潮一区二| 91精品麻豆综合熟女| 精品成人乱码一区| 欧美 国产 中文 日韩| 国产超碰成人AV| 加勒比中文字幕一区二区三区四区 | 又粗又爽又大又猛的视频| 一区二区三区不卡视频网站观看 | 日韩av无码专区| av第老页| 亚洲天堂国际无码| 国产亚洲欧美色| 久久欧洲日本| 国产A区B区不卡免费| 日韩一区二区566888444| 91欧美成人版| 国产精品91频道| 艹视频在线播放| 碰碰精品| 欧美人妻无码一区二区三区| 亚洲少妇综合色| 在线色国产| 嗯嗯嗯啊啊啊欧美视频在线| 久久黄'色片| 亚洲美女裸体做爰AV麻豆| 高清无码人妻免费视频在线观看| 日本人人干人人| 女士婷婷五月天激情AV| 中文字幕一区強要| 欧美日韩亚洲综合色| 波多视频网站| 天天AV在| 五月婷婷激情色片| 日本不卡一区二区三区四| 久久色五月天| 印尼熟妇性| 日韩欧美高潮| 婷婷成年网XXXX五月天在线观看|