大鼠心肌細(xì)胞H9C2是原始克隆細(xì)胞系的亞克隆，該細(xì)胞系由Kimes.和Brandt.從胚胎BD1X大鼠心臟組織獲得，并顯示出骨骼肌的許多特性。這個細(xì)胞株中的成肌細(xì)胞能融合形成多核的肌管，并對乙酰膽堿的刺激發(fā)生反應(yīng)。如果培養(yǎng)基中的血清濃度下降到1%，融合發(fā)生得很快。

　　

　　大鼠心肌細(xì)胞H9C2用于大鼠心肌細(xì)胞Hsp60/Hsp10的表達(dá)及抗熱應(yīng)激損傷機(jī)理研究。

　　

　　通過對大鼠和離體培養(yǎng)的鼠源H9C2心肌細(xì)胞進(jìn)行不同時間的熱應(yīng)激處理,擬動態(tài)觀察和了解熱應(yīng)激大鼠心肌細(xì)胞中Hsp60及其相應(yīng)mRNA的轉(zhuǎn)錄和表達(dá)水平,以及Hsp60在體內(nèi)、外心肌細(xì)胞中的定位和分布等特點(diǎn),研究熱應(yīng)激過程中Hsp60的變化規(guī)律與大鼠心肌細(xì)胞熱應(yīng)激損傷的相關(guān)性,探討Hsp60的組織細(xì)胞保護(hù)機(jī)制。

　　

　　為研究熱應(yīng)激對體內(nèi)、外大鼠心肌細(xì)胞造成的應(yīng)激性損傷及其程度,本試驗通過病理學(xué)檢測,觀察了受試大鼠心肌細(xì)胞和鼠源H9C2心肌細(xì)胞在遭受不同時間的熱應(yīng)激處理后所呈現(xiàn)的應(yīng)激性損傷變化。試驗結(jié)果顯示,熱應(yīng)激處理初期,受試大鼠的呼吸頻率加快,被毛粗亂,煩躁不安,隨后大量出汗,俯臥少動。待熱應(yīng)激處理至60min時出現(xiàn)大鼠的熱應(yīng)激猝死,熱應(yīng)激處理100min后,50%的受試大鼠猝死,熱應(yīng)激處理2h內(nèi),100%的受試大鼠發(fā)生猝死;離體培養(yǎng)的H9C2心肌細(xì)胞在遭受熱應(yīng)激的時間達(dá)60min時,細(xì)胞的活力和存活率開始顯著下降,熱應(yīng)激處理240min后,約50%的H9C2大鼠心肌細(xì)胞死亡。

　　

　　說明離體培養(yǎng)的大鼠心肌細(xì)胞H9C2對熱應(yīng)激的耐受時間更長;組織病理學(xué)結(jié)果顯示,熱應(yīng)激處理20min后大鼠心肌細(xì)胞腫脹,心肌細(xì)胞質(zhì)渾濁,呈現(xiàn)明顯的顆粒變性。熱應(yīng)激處理40min組大鼠的部分心肌細(xì)胞發(fā)生明顯的顆粒變性,細(xì)胞質(zhì)嗜酸性顯著增強(qiáng)。熱應(yīng)激處理至100min組大鼠的心肌細(xì)胞斷裂較為明顯,心肌細(xì)胞核濃縮;細(xì)胞病理學(xué)結(jié)果顯示,20min熱應(yīng)激處理組H9C2大鼠心肌細(xì)胞的體積腫大,形態(tài)變圓,細(xì)胞漿內(nèi)出現(xiàn)少量的紅染顆粒。40min熱應(yīng)激處理組心肌細(xì)胞的胞漿內(nèi)出現(xiàn)較多的紅染顆粒。60min熱應(yīng)激處理組H9C2大鼠心肌細(xì)胞出現(xiàn)脫落現(xiàn)象,細(xì)胞形態(tài)變圓且細(xì)胞邊緣出現(xiàn)不規(guī)則的突起,細(xì)胞體積顯著變大,胞漿內(nèi)出現(xiàn)大量密集分布的紅染顆粒。

　　

　　熱應(yīng)激導(dǎo)致的大鼠心肌細(xì)胞和離體培養(yǎng)鼠源大鼠心肌細(xì)胞H9C2的病理學(xué)變化均隨著熱應(yīng)激處理時間的延長而加劇,但離體培養(yǎng)心肌細(xì)胞表現(xiàn)出更強(qiáng)的熱應(yīng)激耐受性。為研究動物心肌細(xì)胞內(nèi)Hsp60表達(dá)變化在熱應(yīng)激性心肌損傷以及動物猝死中的作用,本試驗通過熱應(yīng)激過程中體內(nèi)、外大鼠心肌細(xì)胞中Hsp60及其相應(yīng)mRNA的表達(dá)水平和在細(xì)胞的定位等進(jìn)行了動態(tài)觀察,并對Hsp60表達(dá)改變與心肌的熱應(yīng)激損傷的相關(guān)性進(jìn)行了比較分析。