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NRK-52E 大鼠腎細胞/鏡像綺點(iCell)

產品型號: NRK-52E
產品時間: 2025-05-19
描述:NRK-52E 大鼠腎細胞/鏡像綺點(iCell)
NRK-52E 大鼠腎細胞介紹
1) 來源:大鼠,正常腎
2) 形態(tài):上皮細胞樣,貼壁生長
3) 含量:>1x106 個/mL
4) 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
6)準備DMEM培養(yǎng)基;小牛血清,10%;添加10ng/ml EGF

產品介紹

NRK-52E 大鼠腎細胞/鏡像綺點(iCell)特性

1) 來源:大鼠,正常腎

2) 形態(tài):上皮細胞樣,貼壁生長

3) 含量:>1x106 個/mL

4) 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性

5) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

 

運輸和保存

可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式:

(1)干冰運輸,收到后立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇;

(2)存活細胞,收到后應繼續(xù)生長,傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。

(3)收到細胞后請拍照,3天內如果發(fā)現(xiàn)污染,請及時拍照與我們聯(lián)系。

 

NRK-52E 大鼠腎細胞/鏡像綺點(iCell)接受后的處理:

1) 收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。

2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。

3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml新的*培養(yǎng)基。

4) 如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代。

5) 接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們取得聯(lián)系。

 

細胞用途:僅供科研使用。

                       

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程,供參考

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

1) 準備DMEM培養(yǎng)基;小牛血清,10%;添加10ng/ml EGF;雙抗,1%。

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。

二. 細胞處理:

1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細胞的培養(yǎng)基終止消化。

3. 輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 移入到事先準備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。

注:*次傳代推薦傳代比例為1:2,以后傳代比例可根據(jù)客戶需要自己決定。

3) 細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,先要消化處理并進行細胞計數(shù)。消化方法按照細胞傳代方法的1-3步驟進行,后的重懸液使用血清。懸浮細胞直接計數(shù)后離心,用血清重懸浮,加DMSO至終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。

下面T25瓶為例;

1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入2ml*培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。

2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。

3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

鏡像綺點(上海)細胞技術有限公司主要產品和服務介紹:

        一、原代細胞服務:
               各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源
               多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源
               原代細胞分離和培養(yǎng)相關試劑、kit、培養(yǎng)基添加劑等
               原代細胞相關技術服務及整體實驗外包服務

        二、細胞系服務:
               細胞株/系培養(yǎng)、增殖、凍存和相關說明書
               細胞系培養(yǎng)過程的技術指導
               細胞系培養(yǎng)基、添加劑、血清及相關生長因子、試劑等

        三、iPS細胞服務:
               iPS細胞基礎培養(yǎng)(有滋養(yǎng)層or無滋養(yǎng)層)
               iPS細胞增殖及冷凍保存
               iPS基礎培養(yǎng)技術實習
               新藥及實驗儀器上市前評估

        四、其他技術外包服務、客戶定制服務等

鏡像綺點(上海)細胞技術有限公司

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